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在室溫中植物ELISA檢測試劑盒操作的流程事項

發(fā)布時間:2017-06-21   點擊次數(shù):1276次
   在室溫中植物ELISA檢測試劑盒操作的流程事項
  
  植物ELISA檢測試劑盒操作步驟
  
  各試劑在使用前平衡至室溫。
  
  1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。除空白孔外,余孔分別加標準溶液或待測樣品100ul,注意不要有氣泡,輕輕混勻,酶標板加上蓋,37℃反應120分鐘。
  
  2.棄去液體,甩干,不用洗滌。
  
  3.每孔加檢測溶液A工作液100ul,37℃,60分鐘。洗板3次,350ul/每孔,甩干。
  
  4.每孔加檢測溶液B工作液100ul,37℃,60分鐘,洗板5次,甩干。
  
  5.依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色30分鐘(此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯)。
  
  6.依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(此時蘭色立轉黃色)。用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
  
  植物ELISA檢測試劑盒注意事項:
  
  1.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
  
  2.一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  
  3.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。
  
  4.如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
  
  5.在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。
  
  6.底物請避光保存。
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