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這么操作昆蟲elisa檢測試劑盒,的得到你想要的結(jié)果

發(fā)布時(shí)間:2018-09-26   點(diǎn)擊次數(shù):2188次
   這么操作昆蟲elisa檢測試劑盒,的得到你想要的結(jié)果
  
  昆蟲elisa檢測試劑盒操作步驟:
  
  1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
  
  2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
  
  3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。
  
  4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
  
  5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。
  
  6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對照孔不加。
  
  7、溫育:重復(fù)4的操作。
  
  8、洗板:重復(fù)5的操作。
  
  9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,37℃避光顯色15min。
  
  10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  
  11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
  
  12、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計(jì)算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。終濃度為實(shí)際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
  
  昆蟲elisa檢測試劑盒注意事項(xiàng):
  
  1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
  
  2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
  
  3、建議昆蟲elisa檢測試劑盒所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
  
  4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
  
  5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml,超過此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準(zhǔn)確結(jié)果(0.1-200ng/ml范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本終濃度。
  
  6、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時(shí)間。
  
  7、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照每加一個(gè)就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。
  
  8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號(hào)的試劑不得混用。
  
  9、底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。
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