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ELISA 實驗中給檢測樣本加樣的步驟詳解

發(fā)布時間:2018-08-06   點擊次數(shù):2813次

1. 細(xì)胞上清:前處理必須是細(xì)胞離心去除,每孔直接加 100μl 即可。如果濃度太高需稀釋時,用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。

2. 腦脊液:前處理必須是細(xì)胞離心去除,每孔直接加 100μl 即可。如果濃度太高需稀釋時,用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。

3. 血清血漿:加入 50 ul 樣本分析緩沖液后加 50 ul 標(biāo)本, 如稀釋量大,請將樣本與樣本分析緩沖液等量加入,不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)充至 100ul。

  • ① 血清標(biāo)本應(yīng)是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;
  • ② 血漿標(biāo)本,推薦用 EDTA 的方法收集若待測樣本不能及時檢測,標(biāo)本收集后請分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融。
  • ③ 血清標(biāo)本不應(yīng)添加任何防腐劑或抗凝劑;
  • ④ 標(biāo)本應(yīng)清澈透明,檢測前樣本中如有懸浮物應(yīng)通過離心去除。
  • ⑤ 請勿使用溶血,高血脂或污染的標(biāo)本檢測,否則結(jié)果將不準(zhǔn)確。


4. 組織勻漿液的樣本:要制備過程中需要在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑,防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解,造成檢測結(jié)果的值偏低。因組織勻漿液的樣本蛋白種類多,含量豐富,實驗參照血清血漿標(biāo)本的處理方法進(jìn)行,否則就會影響實驗結(jié)果。具體是加入 50 ul 樣本分析緩沖液后加 50 ul 標(biāo)本,需稀釋時,請將樣本與樣本分析緩沖液等量加入,不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)充至 100ul。

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